程颖：循环细胞在小细胞肺癌临床研究中的重大突破

可逆细胞膜( Circulating tumor cells，CTCs)作为一种可替代原发的“液体检查和骨骼”，已在冠心病乳腺癌、癌和结直肠癌中会应用于病症评价。小细胞膜膀胱癌(Small celllung cancer，SCLC)的组织骨骼举例来说严重不足，且依赖于有效的监测住院移出和得出结论病症的生物研习标志物。近年来科研习实证CTCs在SCLC中会的流行病研习系统设计进行了聚焦功能性科研习研究，找到CTCs对SCLC的病患、已确定，监测住院、移出，风险评估、病症以及设立理论抗生素程方案等不具重要意涵，本文就CTCs在SCLC流行病研习系统设计中会的科研习研究进展予以综述。

一、SCLC病征CTCs的测定统计分析方法律条文

CTCs的测定统计分析方法律条文主要有流式细胞膜测定系统设计( fluocytometry，FCM)、逆转录一聚合酶链反应(reverse-transcriptionPCR，RT-PCR)、CellSearch系统对、CTC芯片(CTC-chip)系统设计和管壁滤过分离细胞膜系统设计(isolation by size of epithelial tumor cells．ISET)等，其中会CellSearch系统对因其半自动化的操写作者该平台，很高的抗体、抗体和可重复功能性，成最不常系统设计的CTCs测定统计分析方法律条文。

更早在2004年，Allard等率先系统设计CelISearch法律条文测定了99可有膀胱癌（未列出SCLC可有数）病征的CTCs，随后Nagrath等换用CTC-chip法律条文测定了55可有膀胱癌病征肺脏精气C TCs。2009年以后的科研习研究多换用CeIISearch法律条文测定SCI．C病征肺脏精气CTCs，然而该统计分析方法律条文由于对依赖于上皮细胞膜构造的细胞膜会浮现漏检也许，且与免疫磁珠及抗体建构的CTCs未能律条文行某些近期的测定，流行病研习系统设计受到上都。

近年来，随着激光信息技术的工业发展，核酸CTCs表面标志物的抗体识别分f省略的激光材料建构微流控系统设计的CTCs测定该平台的科研习研究受到广泛注意，2013年，《自然》（Nature）周刊将CTCs激光测定评出最具创新功能性和转换成潜质的病患新统计分析方法律条文，成果实在太瞩目。但就目前为止来看，基本的CTCs测定统计分析方法律条文各有利弊，未有科研习研究得出结论哪种统计分析方法律条文对SCLC的CTCs测定来得有优势。着眼下一代，亟需系统设计开发抗体、抗体来得高的CTCs测定系统设计，为SCLC的基础和流行病研习科研习研究助长突破。

二、CTCs在SCLC流行病研习系统设计中会的科研习研究从根本上

（一）CTCs小数与SCLC的病患、已确定

近年来多项科研习研究表明CTCs小数总体与SCLC的病患、已确定有密切关系0 2009年Tanaka等系统设计CeIISearch法律条文测定了1 50可有7.5ml肺脏精气CTCs，其中会膀胱癌1 25可有、非恶功能性25可有，膀胱癌病征包括116可有非小细胞膜膀胱癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)和9可有SCLC。

科研习研究得出结论SCLC病征CTCs阳功能性率为66.70-/0（6可有／9可有），轻微高于NSCLC病征的CTCs阳功能性率(腺癌25.9%，鳞癌40.9%；腺癌对比SCLC，P

同年，Hou等系统设计CeIISearch法律条文测定了50可有初治的SCLC病征肺脏精气CTCs，包括20可有上都期SCLC (limited disease，LD-SCLC)病征和30可有广泛期SCLC(extensive disease，ED-SCLC)病征，终端期ED-SCLC及LD-SCLC病征的中会位CTCs小数分列237和2个/7.5ml精气，7可有未已确定CTCs的病征原则上为LD-SCLC，确实CTCs小数总体与SCLC已确定方面。

相像的得出结论在2012年被日本历史研习者Naito等得出结论，科研习实证在51可有SCLC病征中会立用CeIISearch法律条文测定终端期CTCs总体，得出结论ED-SCLC,病征的中会位CTCs小数为9.5个f 7.5ml精气，而LD-SCLC仅为1个／7.51111精气，正因如此面确实ED-SCLC病征的CTCs总体高于LD-SCLC病征。

（二）CTCs风险评估SCLC的及病症

CTCs确实可作为风险评估SCLC和病症的有救指f,匙科研习实证们长期以来在探讨的疑虑。Houi等在2009年通过CellSearch法律条文测定了50可有SCLC病征(LD-SCLC20可有，ED-SCLC30可有)的CTCs，找到CTCs>300个/7.5ml精气的病征及CTCs

终端期CTCs>=50和

在该科研习研究中会SCLC病征的病症界定数值旧版8个/7.5ml精气，借以将病征总称CTCs>=8及

Hiltermann等在2012年同样系统设计CellSearch法律条文测定59可有SCLC病征在终端期、1略长周期抗生素后及4略长周期抗生素结束后外固精气CTCs总体，其中会ED-SCLC病征38可有，LD-SCLC病征2 1可有c终端期有43可有病征(730-/o)CTCs≥2个/7.5ml精气，CTCs>215个/7.5ml精气和CTCs

经过1略长周期抗生素后病征CTCs总体轻微降低，且1略长周期抗生素后CTCs

科研习实证推断CTCs总体是SCLC病症的独立影响突变，其中会1略长周期抗生素后CTCs总体是SCLC和病症最强的得出结论突变。

2013年ASCO发表的ECOG1508科研习研究中会，科研习实证想法在155可有ED-SCLC中会加入核酸疗程，并对其中会123可有病征终端期CTCs进行测定，得出结论核酸疗程未能延长ED-SCLC病征的PFS和OS，但找到终端期CTCs≤l00和CTCs>100个／7.5ml精气的mPFS分列4.4和4.3个年初（P=0.07），OS分列10.7和7.2个年初(P=0.01)。科研习实证看来虽然核酸疗程没能大幅提高ED-SCLC病征的PFS和OS，但却找到了CTCs也许是SCLC病征的病症标志物。

最近，Igawa等想法系统设计OBP-401实验测定SCLC病征肺脏精气CTCso系统设计OBP-401实验测定乳腺癌和胃癌病征CTCs的方面科研习研究有数晚期报道。科研习研究扩及30可有韧治的SCLC病征，29可有病征(96%)肺脏精气CTCs阳功能性。在终端期，21可有病征CTCs

（三）CTCs监测SCLC的住院和移出

基本的科研习研究表明通过测定CTCs的浮现来监测SCLC的住院和移出不具重要的流行病研习意涵o Tanaka等科研习研究找到CTCs总体‘j 125可有膀胱癌病征（包括9可有SCLC病征）进展轻微方面，特别是与远方移出密切（AUC-ROC 0,873 p

基于这些数据，写作者看来CTCs可作为监测膀胱癌远方移出的生物研习标记物。Natio等科研习研究找到SCLC在终端期、疗程结束后及住院后CTCs的阳功能性率分列68.6%、26.5%和67.6，指引SCLC住院后肺脏研习CTCs总体升高，引发远方移出脏器的数目为0、1和>=2的病征其中会位CTCs小数分列2.0、7.5和21个/7.5ml精气,指引CTCs总体与远方移出脏器的数目有关，远方移出越多，CTCs小数越高（p

三、CTCs在SCLC流行病研习系统设计中会的聚焦朝向

住院和移出是导致病征疗程失败和死亡的主要状况，无济于事的住院和移出并采敢大力有效的疗程措施可非常大大幅提高病征生存率。然而，由于SCLC依赖于能够监测住院和移出的生物研习标志物，且不常规某类体检未能律条文找到微移出灶及微小残留溃疡，导致引发住院和移出的SCLC病征不可及时接受病患和疗程。

流行病研习中会一小LD-SCLC的病征病症差别较大，指引有些上都期的病征在病患时也许已引发了某类不可找到的微移出而成潜在的广泛期病征。通过测定肺脏精气CTCs的浮现及数目变化从而对SCLC病征体内状况进行实时、时序地监测和评价，无济于事的住院、移出，将有助于流行病研习医师对疗程时机的把握和疗程策略的为了让，但究竟CTCs的数目或变化数值为多少时能够正确看出SCLC的住院或移出尚不明确，所需来得多的循证医研习确实予以支持。

CTCs在风险评估SCLC病征疗程之外的系统设计尚处于聚焦收尾，疗程流程中会CTCs数目的变化与SCLC病征抗生素的依赖功能性及其与SCLC病征放疗时机的为了让等疑虑在下一代需大量的流行病研习科研习研究。近5年，对CTCs确实可作为SCLC病征病症指标的科研习研究迅速增多，但SCLC最佳的病症CTCs界定数值尚无定论，争论颇多。

其中会3项来自Hou、Naito、Hiltermann的科研习研究将SCLC的病症CTCs畀定数值分别旧版为50、8和2个／7.5ml精气，差别非常大，这也许与科研习研究换用的统计研习统计分析方法律条文不尽相同以及入组样本量较少有关。近期比利时历史研习者Normanno等原则将ED-SCLC和LD-SCLC病征分离科研习研究，对终端期、l略长周期抗生素后CTCs以及疗程前后CTCs的变化数值分别旧版病症界定数值，为下一代的科研习研究提供了新的出发点。确所在的科研开发团队也时是专注要务SCLC病征病症最佳CTCs界定数值的科研习研究，结果实在太憧憬。

的理论抗生素程是疗程模式的工业发展朝向。SCLC病征对抗生素药剂的反应存在轻微的个体差别，其主要状况也许与复杂的异质功能性、基因表达差别及多态功能性有关。所以，逐步明晰SCLC的基因研习构造对意味着真时是意涵上的SCLC理论抗生素程尤为重要。近期要务历史研习者王洁等科研习研究人员通过系统设计单细胞膜基因测序暴力手段对病征单个CTC进行正因如此基因、外显子基因测序。

在此项科研习研究中会，谢晓亮副教授发明的多重热处理和加成反应可逆的扩增系统设计(MAIBAC)，成功意味着了对病征肺脏精气单个CTC的正因如此基因扩增和厚度测序，在单个细胞膜总体探测正因如此基因基因拷贝数性状(CNVs)和单核苷酸性状(SNVs)o单细胞膜总体CTCs基因测序系统设计可及时提供如致病遗传等理论抗生素程所需的重要信息，同时也为下一代SCLC核酸药剂的系统设计开发提供系统设计支持。

SCLC的组织骨骼难以获取，容许了近期各项体检和科研习研究的开展，而利用CTCs构建的SCLC可逆细胞膜移植肿( CTC-derived explants，CDXs)模型，有望解决这一棘手困境。最近，Hodgkinson等想法将6可有ED-SCLC病征lOml肺脏精气中会的CTCs提取后注射到免疫缺陷小鼠皮下，结果在4只小鼠身上产生了CDXs，确实SCLC病征的CTCs不具致肿功能性。

同时系统设计CelISearch法律条文测定这6可有SCLC病征的CTCs，得出结论成功产生CDXs的4可有病征的CTCs小数原则上>400个／7.5ml精气，而另外2可有未产生CDXs的病征其CTCs小数分列222和20个／7.5ml精气，指引SCLC的CTCs致肿功能性与肺脏精气CTCs教量有关。正因如此面统计分析找到远比于抗生素抗体SCLC，抗生素致病功能性SCLC病征的CDXs倍增时间略长、生长来得迅速。对3可有CDXs给予顺铂和相结合泊苷抗生素药剂，其抗体顺序为CDX3>CDX2>CDX4，适当病征的OS分列9.7.3.5.0.9个年初，指引对CDXs进行胃药敏实验可以间接反应病征生存时间。

该科研习研究表明一小SCLC的肺脏精气CTCs不具干细胞膜特功能性，可进行胃培养、产生与原发高度相像的CDXs，为SCLC病征的胃药敏实验、致病机制统计分析等一系列体检和科研习研究提供了足量的的组织，解决了SCLC病征骨骼举例来说严重不足的疑虑。

得出结论

从现行的科研习研究可以窥见，虽然CTCs在SCLC中会的流行病研习系统设计仍处于聚焦收尾，但前景辽阔。目前为止，诸多转换成功能性科研习研究时是在进行中会，相信随着科研习研究的不断深入，CTCs有望成SCLC的突破口，憧憬CTCs在SCLC的系统设计领域中会为我们助长惊喜。

总编辑： 雪